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紫外可見分光光度計線性動態(tài)范圍,真的很重要!

發(fā)表時間:2022-07-06      點擊次數:11911
  紫外可見分光光度計是一種很重要的分析儀器,在使用一臺新的紫外可見分光光度計儀器前,一般需要先對儀器的線性度進行測試。但大多數使用者只是在某一試樣的某一濃度附近,用濃度的倍數變化來測出這一段的線性度。這只能反映儀器在小范圍內的使用情況,并不能說明儀器的線性度是否符合出廠指標,也不能反映儀器的線性范圍。因此,在儀器使用前對其線性度的測試有著重要的意義!
  如果儀器使用在非線性區(qū),肯定會因非線性而產生誤差。為了保證分析測試結果的可靠性,應使用在儀藉的線性區(qū)。使用者總是希望對很稀的樣品分析時,其分析測試的結果在所要求的誤差范圍內。
  對很濃的樣品分析時,其分析測試的結果也在所要求的誤差范圍內;這就只有儀器的線性動態(tài)范圍很寬的時候才能做到。有人認為樣品可以進行濃縮或稀釋處理,但這樣不僅增加工作量、操作煩瑣,還會帶來誤差。所以我們總是希望分光光度計的線性動態(tài)范圍大者好。
  線性動態(tài)范圍的定義是:zui大線性區(qū)(保證相對誤差的線性區(qū)域)的吸光度值Amax, 除以zui小線性區(qū)(保證1%相對誤差的線性區(qū)域)的吸光度值Amin。即LDR=Amax/Amin ;或zui大線性區(qū)(保證1%相對誤差的線性區(qū)域)的濃度Crnax除以zui小線性區(qū)(保證1%相對誤差的線性區(qū)域)的濃度cmin,即:LDR=Cmax/Cmin。
  紫外可見分光光度計的線性動態(tài)范圍取決于儀器的雜散光和噪聲。因為,雜散光是儀器分析測試誤差的主要來源,它限制被分析測試樣品濃度的上限。
  另外噪聲也是光度計誤差的主要來源之一。它限制被分析樣品濃度的下限。許多高檔紫外可見分光光度計都給出儀器的光度噪聲,高檔的儀器光度噪聲可達±O.0002。所以高精度的紫外可見分光光度計線性動態(tài)范圍很寬(或能分析的樣品的濃度很低時,還可保證在誤差范圍內)。有的噪聲大多在±o.002左右。因此線性動態(tài)范圍就較窄(能保證1%相對誤差時的濃度下限較大,或下限濃度較高)。
  雜散光的影響要比噪聲小,并且雜散光影響的是高濃度時的分析誤差,而噪聲是影響低濃度時的分析誤差;所以不管是儀器的設計還是使用都應該注意到這一點。
  測試方法
  分光光度計線性度測試的方法很多,常用的方法大致有[4]:
  (1)溶液稀釋法:將重鉻酸鉀稀釋到不同濃度,測量不同波長處的吸光度(一般需測85個吸光度值),然后根據此數據作曲線,判斷線性度。
  (2)中性濾波片法:一般以3塊中性濾波片疊加,比較測定值與計算值之差來判斷線性度。
  (3)百分法:使被測試樣濃度成倍增加,測其吸光度并作曲線,判斷實驗值偏離比爾定律直線部分的程度。
  (4)改變池厚法:用不同厚度的樣品池來測量重鉻酸鉀的吸光度,以此觀察光度計的線性度。
  (5)旋轉扇形板法:將不同透射率的扇形板置于樣品光束中旋轉,測出各點透射率并與真值進行比較。
  (6)光疊加法:利用雙孔規(guī)來分段測量,然后用曲線判斷線性度。
  綜上所述,紫外可見分光光度計的線性動態(tài)范圍非常重要,它將限制儀器的使用范圍(即限制儀器的適用性)。因此不管制造者還是使用者,都必須對儀器的線性動態(tài)范圍引起高度重視,才能提高儀器的水平。才能提高使用者的分析測試技術水平。
紫外可見分光光度計
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